为什么碱性化合物在新的反相色谱柱上拖尾会更多，然后随着进样次数的增多，拖尾会减少？- WKB235916

环境

• 反相色谱柱
• 拖尾
• 峰形
• 硅醇

答案

碱性分析物拖尾发生的情况如下：

• 颗粒表面的硅醇基 (Si-O^-) 在 pH 大于 2.0 的条件下通常带负电荷。
• 碱在低 pH 环境中通常带正电荷。
• 出现拖尾是因为颗粒表面带正电荷的碱基与带负电荷的硅醇基形成离子对。

当使用新的硅胶颗粒反相色谱柱或杂化颗粒色谱柱并且方法的 pH > 2.0 时：

• 表面硅醇基带负电荷，因此该色谱柱可作为反相色谱柱和阳离子交换色谱柱。
• 在首次进样时，碱性分析物可以完全与这些硅醇基团形成离子对。

随着越来越多的碱性分析物进样到色谱柱中：

• 之前进样的碱性分析物可能会与硅醇基团形成离子对而吸附到填料上。
• 随着越来越多的分析物与填料形成离子对，在后续进样中可吸引碱性分析物的硅醇基越来越少。
• 由于可接触的硅醇基较少，之后的进样可能会显示出较少的拖尾。这种“阻止”分析物与硅烷醇相互作用的过程称为“钝化”(conditioning)。

附加信息

在观察到这种趋势的新色谱柱上，降低拖尾量的一种方法是用高浓度的碱性分析物标准品在新色谱柱上进行至少三次“钝化进样”。此步骤的目的是用碱性分析物饱和活性位点（硅醇基团），阻止以后样品进样中的分析物与硅醇的相互作用。

另请参阅：

使用 C18 色谱柱运行反相法时，如何减少碱性化合物的拖尾？- WKB92122