化合物在 HILIC 色谱柱上保留很少或没有保留,和/或出现峰型问题的常见原因是什么? - WKB235914
环境
- 亲水作用色谱 (HILIC)
- 亚乙基桥杂化颗粒 (BEH)
- ACQUITY Premier
- ACQUITY UPLC Amide
- Atlantis Premier
- BEH Z-HILIC
- CORTECS
答案
保留问题可能由以下原因引起:
- 第一次进样前,色谱柱开箱后活化不正确。
- 使用了反相梯度(低有机溶剂到高有机溶剂)。
- 每次梯度结束时色谱柱重新平衡不正确。
峰形问题可能由以下原因引起:
- 第一次进样前,色谱柱开箱后活化不正确。
- 强样品溶剂效应。
- 流路连接不良(任何类型的 LC 色谱柱都可能出现此问题)。
附加信息
如果在首次进样之前未完全活化 HILIC 色谱柱,可能会导致保留性差和/或出现峰形问题。
忘记为 HILIC 分离分配正确的流动相瓶也可能偶然发生。在 HILIC 中,始终以约 95% 的乙腈(弱溶剂)和约 5% 的水性缓冲溶液(强溶剂)开始进行分离。然后用逐渐增加水的溶液洗脱。也可以使用其他极性溶剂进行洗脱。
Atlantis Premier BEH Z-HILIC Columns Care and Use Manual(《Atlantis Premier BEH Z-HILIC 色谱柱维护和使用手册》)
ACQUITY UPLC and ACQUITY Premier BEH Columns Care and Use Manual(《ACQUITY UPLC 和 ACQUITY Premier BEH 色谱柱维护和使用手册》)
XBridge XP and XBridge Premier 2.5 μm BEH Columns Care and Use Manual(《XBridge XP 和 XBridge Premier 2.5 μm BEH 色谱柱维护和使用手册》)
XBridge Columns Care & Use Manual(《XBridge 色谱柱维护和使用手册》)
CORTECS 1.6µm Columns Care & Use Manual(《CORTECS 1.6 µm 色谱柱维护和使用手册》)
CORTECS 2.7um Columns Care & Use Manual(《CORTECS 2.7 µm 色谱柱维护和使用手册》)
网络研讨会:
保留极性的方法 |网络研讨会系列(3 部分):
第 1 部分:使用反相液相色谱技术保留并分离极性化合物的提示和技巧
第 2 部分:使用亲水作用色谱 (HILIC) 技术成功分析极性化合物
第 3 部分:保留和分离极性酸性化合物:了解混合模式反相/阴离子交换色谱
视频:Atlantis Premier BEH Z-HILIC 色谱柱的优势
id235914, acetonitrile, 酰胺