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Waters China

QTof 质谱仪分析 mAb 的分辨率较差 - WKB3880

故障描述

  • 主峰与次级峰或三级峰之间的分离度很差。
  • 次级峰和三级山峰几乎看不见。
  • 峰组间的峰谷可能达不到基线。

环境

  • ACQUITY QTof LC/MS 系统
  • Xevo QTof
  • Xevo G2 QTof
  • Xevo G2-S
  • Xevo G2-XS
  • Synapt G1
  • Synapt G2
  • Synapt G2-S 
  • Synapt G2-Si
  • ACQUITY
  • 完整蛋白质
  • 重链
  • 轻链

原因

LC 被污染。

修复/解决方法

  1. 拆下色谱柱,用双通替换。
  2. 将 ACQUITY 的 A 和 B 管路放入清洗混合溶液中(含 0.2% 甲酸的 25/25/25/25 水/异丙醇/甲醇/乙腈)。
  3. 灌注 5 分钟以冲洗系统,然后以至少可使压力达到 6000 psi 的流速泵送至少 2 小时。
  4. 用 LC/MS 级或新鲜的 Milli-Q 水灌注并冲洗系统。
  5. 放入用于 mAb 分析的新鲜溶剂。如果已有一段时间未清洗溶剂瓶,请使用清洗混合溶液清洗溶剂瓶,然后用新鲜分析溶剂彻底冲洗。
  6. 安装新的色谱柱。
  7. 用新鲜分析溶剂灌注色谱柱,冲洗出其中的水。
  8. 重新运行 mAb 样品。

附加信息

 

id3880, acetonitrile, intact protein, methanol, 单克隆抗体