QTof 质谱仪分析 mAb 的分辨率较差 - WKB3880
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故障描述
- 主峰与次级峰或三级峰之间的分离度很差。
- 次级峰和三级山峰几乎看不见。
- 峰组间的峰谷可能达不到基线。
环境
- ACQUITY QTof LC/MS 系统
- Xevo QTof
- Xevo G2 QTof
- Xevo G2-S
- Xevo G2-XS
- Synapt G1
- Synapt G2
- Synapt G2-S
- Synapt G2-Si
- ACQUITY
- 完整蛋白质
- 重链
- 轻链
原因
LC 被污染。
修复/解决方法
- 拆下色谱柱,用双通替换。
- 将 ACQUITY 的 A 和 B 管路放入清洗混合溶液中(含 0.2% 甲酸的 25/25/25/25 水/异丙醇/甲醇/乙腈)。
- 灌注 5 分钟以冲洗系统,然后以至少可使压力达到 6000 psi 的流速泵送至少 2 小时。
- 用 LC/MS 级或新鲜的 Milli-Q 水灌注并冲洗系统。
- 放入用于 mAb 分析的新鲜溶剂。如果已有一段时间未清洗溶剂瓶,请使用清洗混合溶液清洗溶剂瓶,然后用新鲜分析溶剂彻底冲洗。
- 安装新的色谱柱。
- 用新鲜分析溶剂灌注色谱柱,冲洗出其中的水。
- 重新运行 mAb 样品。
附加信息
id3880, acetonitrile, intact protein, methanol, 单克隆抗体