PDA 和 QDa 检测器上的多组分峰纯度 - Tip258

目的

一旦您认为某个峰的谱图不纯，您可能想知道色谱峰下有多少谱图不同的组分。多组分峰纯度测试会有所帮助。以下为测试方法：

环境

• Empower
• Empower 每周小贴士 #258

步骤

步骤 1
查看一个样品中的咖啡因峰，您可以得出该峰的谱图不纯的结论。纯度角大于纯度阈值，“纯度图”显示阈值线上方的纯度线朝向峰尾。（在“查看”中选择“结果”工具可找到此界面）（图 1）。

步骤 2
添加一个标记以显示“最大不纯度点”，这是峰内纯度角/纯度阈值比率最大的点。在“图属性”中选择“标注峰顶点”/“最大不纯度”（图 2）。

步骤 3
要确定咖啡因峰下有多少不同谱图的组分，请转到“处理方法”的“纯度”选项卡下，使用“纯度通道”功能，“纯度通道”“1”是缺省值（图 3）

步骤 4
将“纯度通道”设置为“2”，Empower 选择两个分析谱图：从“纯度通道 1”获得的“顶点谱图”和“最大不纯度谱图”。然后 Empower 将这 2 个分析谱图与峰上的每个剩余谱图进行比较。
• 对于每个峰谱图，Empower 将两个分析谱图相叠加，生成模型谱图。
• 在创建叠加时，Empower 首先将缩放因子应用于每个分析谱图。模型谱图的形状和归一化取决于这些缩放因子的值。
• Empower 调整两个缩放因子，改变模型谱图的形状和归一化，直至找到与目标峰谱图在最小二乘意义上最匹配的模型谱图。
• Empower 计算此最佳匹配模型谱图与目标峰谱图之间的谱差角。Empower 在“纯度图”上绘制第二个纯度
通道的谱差角。
• 对每个峰的谱图重复上述步骤后，Empower 绘制整个峰第二个纯度通道的纯度角，计算第二个纯度通道的纯度角，并找到“纯度通道 2”的最大不纯度谱图。
• 对于第三个纯度通道，Empower 使用峰顶点谱图、“纯度通道 1”的最大不纯度谱图和“纯度通道 2”的最大不纯度谱图来创建模型谱图，然后继续上述步骤。
• 第四个纯度通道以此类推。

使用数学计算是可行的，因为如果目标谱图和分析谱图都是两种化合物的混合物，那么所有目标谱图都将匹配，即两个分析谱图的各自“最佳拟合”的总和。如果目标谱图和分析谱图都是三种化合物的混合物，那么一些目标谱图将不匹配两个分析谱图的“最佳拟合”总和，但将匹配三个分析谱图的所有“最佳拟合”总和。

步骤 5
使用两个纯度通道重新处理数据的结果如下。第二个纯度通道的纯度角度小于纯度阈值，第二个纯度通道的“纯度图”显示绿线低于峰内的蓝线。图中带有“M”的谱线是“纯度通道 1”的最大不纯度点，带有“2”的线是“纯度通道 2”的最大不纯度点（图 4）。

步骤 6
针对该峰的结论是，峰下有两种谱图不同的组分，咖啡因和杂质。请参阅纯度通道结论的汇总图表（图 5）。

附加信息

最终说明：可以使用 Pro 或 QuickStart 界面完成以上步骤。