在梯度运行期间，建议用于清洗色谱柱的色谱柱体积是多少？- wkb51034

环境

• 色谱柱清洗
• 梯度运行

答案

建议在梯度运行之间清洗色谱柱至少需要 3~5 个色谱柱体积。必须将 LC 系统中的延迟体积考虑在内。

附加信息

本文讨论的是在梯度运行期间清洗色谱柱应使用多少倍色谱柱体积的溶剂。以反相色谱柱为例，这意味着使用高有机溶剂百分比的溶剂冲洗色谱柱，以清除色谱柱中的疏水性化合物。

清洗后，需要在梯度表中增加色谱柱再平衡步骤，使色谱柱恢复初始条件（以反相色谱柱为例，应恢复 95:5 水/乙腈的初始条件）。Waters 建议在反相色谱柱的梯度表末尾增加 5-10 个空色谱柱体积的再平衡步骤。

有关详细信息，请参阅文章如何计算色谱柱的空色谱柱体积？以及如何确定系统延迟体积？