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如何使用 2475 荧光检测器归一化发射单位 - WKB193270

目的

将 2475 检测器的发射单位归一化为标准水参比。

环境

2475 荧光检测器

步骤

在向系统泵送溶剂或流动相之前,用经过过滤、脱气处理和喷射处理的 HPLC 级水冲洗管路。然后以 1 mL/min 的流速泵送流动相至少 15 min,要求流动相不出现任何混溶性问题。

要归一化发射单位: 

  1. 开启检测器的电源,等待其预热并稳定至少 1 小时。
  2. 用清洁的脱气水以 1 mL/min 的流速(或足以防止形成气泡的流速)流过流通池。
  3. 按 DIAG 键,然后按 1 Normalize Units(1 归一化单位)。

检测器调整 PMT 增益,并将激发单色器波长设置为 350 nm。发射单色器将从 390 nm 到 405 nm 进行扫描,找到水的拉曼信号 (397 nm),将因归一化常数失真造成的波长准确度误差降到最小。发射单色器找到该信号峰后,将优化 PMT 增益,并显示归一化常数。

2475 Normalize Units.png

完成时的归一化值

随着灯和光学元件的老化,Raman Gain(拉曼增益)将逐渐增加到最大值 1000,而 Raman Counts(拉曼计数)值可能会减少。如果水的拉曼信号在 397 ± 3 nm 内,则归一化单位将保存到检测器内存中。

附加信息

如果信号不在此范围内,检测器将不保存该值,而是保留之前的常数。

提示:如果拉曼信号不在 397 ± 3 nm 之内,通常表明流通池中有非纯水物质或流通池不干净。

id193270, 2475, 2475B, A-10FL, flow cell, memory, wavelength