如何在 Empower 3 中显示 474 谱图扫描？- WKB16835

环境

• Empower 3 软件
• 474 扫描荧光检测器

答案

以下程序适用于 Millennium 软件，也适用于 Empower：

1. 请注意，扫描成功取决于选择合适的激发以及发射波长。
2. 发射扫描的开始波长比激发波长高 10 nm。
3. 扫描包括两个操作，存储以及输出存储的谱图。要进行故障排除，请首先扫描流动相并确认其不存在干扰。之后可以从溶解在同一流动相中的标准样品谱图中减去该扫描谱图。
4. 使用带有 HPLC 接头的灌注注射器将流动相填充到流动池中，该接头可直接拧入流通池隔板接头。只使用检测器，断开 HPLC 液流。
5. 按下键盘上的 Scan（扫描）。
6. 屏幕会显示第一个选项：Em Scan（Em 扫描）。
7. 要设置扫描参数，请按 End（结束）键。
8. 点击 edit/enter（编辑/输入），将扫描设置为 STD（如果尚未设置），然后再次点击 edit/enter（编辑/输入）。
9. 将速度更改为最慢的扫描速度；即在闪烁的提示下，使用上箭头键选择“2”，然后点击 edit/enter（编辑/输入）。
10. 点击 Monitor（显示器）键返回 Emission Scan（发射扫描）。（如果要进行其它类型的扫描，请使用向上和向下箭头翻阅其它功能。）
11. 点击 edit/enter（编辑/输入），然后选择内存位置，1-20。
12. 点击 edit/enter（编辑/输入），然后选择激发波长；使用数字键（不需要 shift 键）。
13. 点击 edit/enter（编辑/输入），然后点击 next（下一步）开始扫描，使用 Program Run（程序运行）键。在进入 Millennium 之前启动检测器采集扫描数据。如果激发波长为 300 nm，扫描将在 310 nm 处开始。
14. 进入 Quickset（快速设置）并像往常一样建立仪器和方法集，但不设置流量。
15. 在 Quickset（快速设置）中，加载方法集并点击设置。对于初始扫描测试，只需启动监视基线。您可能需要调整 Gain（增益）以保持扫描的规模。
16. 返回检测器输出现在保存的扫描。点击扫描，然后使用向上箭头键选择 scan function 3, emission spectrum out（扫描功能 3 - 发射谱图输出），或者如 474 EM，D.输出所示。
17. 点击 edit/enter（编辑/输入），选择存储位置，然后再次点击 edit/enter（编辑/输入）。
18. 您可以更改停止和开始波长，但测试时请将其保持在全范围；本示例为 310-900 nm。点击 edit/enter（编辑/输入）翻页。
19. 使用 Program run（程序运行）键启动。数据应显示在 Millennium 监视基线上。如果超出刻度，请降低增益设置，重新采集谱图，然后重新输出。
20. 增益设置正确后，用溶解有活性样品或标准品的流动相进行替换，并重复该过程。然后将流动相谱图与样品谱图进行比较以确认流动相不产生干扰。
21. 当然，如果结果不令人满意，您需要选择一个新的激发波长并重新开始该过程。
22. 要存储输出的谱图，请执行零进样并在软件开始采集数据后点击 Run program（运行程序）键。您可以计算波长；扫描从每秒 1 个数据点开始时会有明显显示。

    Millennium 中的扫描时间分钟数 =

    {(900 nm - (激发波长 + 10 nm))/ 30 nm/s} /Millennium 上显示的分钟数

附加信息