系统受到严重的 PEG 污染或其他污染后，如何使用酸/碱清洁方案清洁 ACQUITY UPLC？- WKB16167

注意 - 请勿使用此步骤清洁带有 HPS 涂层部件的 ACQUITY Premier LC 模块，高浓度的碱和酸会损坏涂层。请按照 KCS wkb116495 中提供的 Premier 步骤进行操作

注：由于 ACQUITY Premier BSM 和 QSM 泵不包含 HPS 涂层的部件，如果输出管路与样品管理器断开并转移到废液中，则可以使用此步骤冲洗泵。酸/碱清洗后，需要用水和 IPA 冲洗泵以去除所有氨，然后再连接回样品管理器

目的

若因为使用了劣质溶剂而导致 ACQUITY UPLC 被 PEG 污染，则背景会一直可见。即使换用高品质溶剂，高灵敏度的质谱仪（如 Vion、Xevo G2-XS 和 Synapt G2-Si）仍会检出 PEG 背景。同时如果使用 BioAccord (RDa) 或 Vion 等分析完整的单克隆抗体，观察到前沿峰，则可以应用此方案。此方案也可用于处理其他污染物。本文将介绍如何按照酸/碱清洁方案清洁 ACQUITY。请订购 LC 清除套件 186010210 来执行酸碱清洗步骤。

环境

• ACQUITY UPLC
• ACQUITY UPLC I-Class
• ACQUITY UPLC H-Class

步骤

1. 拆下 UPLC 色谱柱并替换为双通。在每个冲洗步骤中，将所有溶剂管路放入每个溶剂瓶中。使用 Critical Clean 玻璃瓶套件（订购手册）。如果沉子已经使用了一段时间，还应同时更换沉子。
2. 按照下面所述的确切顺序，用溶剂灌注管路 A 和 B 各 5 min。灌注 FTN 60 s 以执行针清洗，为样品进样器设置 40 个循环。创建一个分析或样品列表，进样 20 次仪器正在运行的溶剂（进样量为 10 μL）。运行时间为 1 min，流速为 0.8 mL/min，A1:B1 为 50:50。将 LC 液流引入废液（而不是质谱仪）。如果使用光学检测器（例如 UV 或 PDA），可使液流通过检测器。只需用水冲洗系统，即可去除系统中以前的溶剂，无需进样。
   1. 用水冲洗系统，以去除客户的流动相。
   2. Magic mix；水 - 乙腈 - 甲醇 - IPA 1:1:1:1，含 2%-10% 甲酸（可以使用丙酮代替乙腈。您可以订购套件 186010210 获取丙酮）
   3. 用水冲洗以去除系统中的酸。
   4. 10% NH4OH 的水溶液（可去除 PEG 和其他聚合物）。
   5. 管路 A1 和 A2 采用 10% NH4OH，B1 和 B2 采用 100％ IPA（管路 A 和 B 采用 H 级 10％ NH4OH，C 和 D 采用 100％ IPA）。这是一种非常强的溶剂组合，可去除 PEG。
   6. 用水冲洗以去除系统中的碱
   7. 100% IPA
   8. 最后用水冲洗
3. 如果不使用甲醇或 IPA 作为洗脱液，则用新的不锈钢石或钛石 (289002172) 更换旧的沉子。

附加信息

氨水的最终浓度必须为 10%。因此，如果使用 28%-30% 的氨水，则只能稀释 3 倍。由于氨水的气味非常强烈，请在通风橱中进行制备，将溶剂瓶放入仪器时也务必小心操作。

请勿在 M-Class 仪器上使用此方案。PeekSil 和硅胶管无法耐受如此高的 pH 值。

步骤 8 时，在将色谱柱和 MS 重新连接回流路之前，请监测水冲洗液的 pH 值以确保其恢复实验室 pH 值。

每周重新制备所有水性流动相，装填前用 Magic Mix（25/25/25/25 水/异丙醇/甲醇/乙腈）或 100% 甲醇或乙腈等有机溶剂冲洗溶剂瓶三次，再用要使用的溶剂冲洗。切勿使流动相溶剂直接加满溶剂瓶，切勿将流动相瓶放入洗碗机。

• 如果您使用质谱仪，请将 MS 流路设置为在清洗步骤之前流向废液或转移流路。这样虽然不会损害阀，但您应该也不希望该液流进入离子源