在发射模式下使用 ACQUITY UPLC FLR 检测器时，更改增益会改变灵敏度吗？ - WKB118420

环境

• ACQUITY UPLC FLR 检测器
• 2475 多波长荧光检测器

答案

■ 可以使用荧光检测器采集的模式
“能量”模式
直接输出荧光强度。强度根据增益而变化。检测限：10000
“发射”模式
在这种模式下，荧光强度将在检测器内部进行校正和计算，然后输出。
使用水拉曼的相对值计算强度。
在归一化时使用拉曼强度和增益值校正荧光强度值，从而输出发射强度。
对于输出值不受增益影响的采集模式，其特征在于各个检测器之间没有强度差异，也不会因检测器劣化而导致强度差异。

■ 对于发射模式
在检测器内部执行以下计算，然后输出强度。
发射单位 = (采集时的荧光强度/采集时的增益) × (归一化时的增益/归一化时的拉曼强度) × 100

采集时的荧光强度：受直接荧光强度的增益影响的值
采集时的增益：采集过程中的增益值（通过仪器方法设置的值）
归一化时的增益：归一化时确定的增益值
归一化时的拉曼强度：归一化时获得的拉曼强度

从上面的公式可以清楚地看出，发射单元被修正为通过归一化单位增益荧光强度而获得的值。
（在归一化中，将确定保持拉曼强度恒定的增益值。）
因此，改变增益不会改变强度。

但是，如果增益太高或太低，则即使在发射模式下，强度也会根据设置的增益而变化。
如果采集时的荧光强度超过 FLR 的检测上限（在能量模式下，最大值 = 10000），则发射单位可能也超出范围。如果发生这种情况，可以降低增益值，直到在能量模式下的强度降至 10000 以下，以获得正确的峰。
另外，如果增益值过低，则即使在发射模式下，强度也会根据增益而不同。
原因考虑为，采集时的荧光强度值过低导致计算的发射强度误差较大。

■ 结论
当增益在化合物的最佳增益范围内变化时，发射单位的强度不会改变，
但是，如果增益值不合适，比如过高或过低，则强度可能会不同，或者增益值可能会超出范围。
在计算发射强度时，计算中使用了增益值，因此，发射模式和增益完全不相关是不正确的。

附加信息