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如何在 Empower 软件中处理 3D PDA 数据(第 1 部分)- Tip134

目的

欢迎回到 Get Empowered!在上一次有关 Empower 色谱数据软件的 Empower 每周一贴中,我们总结了使用峰检测和使用积分算法处理 GPC/SEC 数据 (Tip #133)。

在本周的每周一贴中,我将开始一个新系列,介绍使用 3D PDA 数据确定峰纯度的相关信息。

问:峰纯度这个词是什么意思?

答:峰纯度为光谱均匀性,或者简单来说,是通过评估色谱峰的 UV 光谱,确定这些 UV 光谱是否相同。峰纯度不是化学纯度,请注意 PDA 无法检测到峰内不含发色团的杂质。接下来从“仪器方法”的建议开始。

让我们开始吧!

环境

  • Empower 软件

步骤

  1. 无论型号如何,设置“仪器方法”时都要留意三个关键参数 - 波长范围、分离度和采集速率。波长范围应该从流动相的 UV 截止值以上开始,到包含目标峰吸光度的区域结束。收集数据后,您可以在较小的波长范围内处理数据,我们将在后续的 Empower 每周一贴中对此进行检讨。

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  1. 推荐的分离度为 1.2 nm。这将产生最佳的光谱分离度,即光谱上两点之间的距离。请注意,分离度是 1.2 的倍数。选择任一其他数值将导致二极管聚束或平均。

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在此示例中,将会丢失一些光谱形状,如下图:分别在 1.2 nm 和 3.6 nm 处采集的苯光谱重叠图所示。

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  1. 采集速率应当设置为可以在一个色谱峰上至少产生 12 个光谱。(这是 Empower 计算峰纯度时所需的最小光谱数量)如果您使用的是传统 HPLC,则产生的峰相对较宽,采集速率设置为每秒 1-2 点已经足够。如果您正在进行 UPLC 或 UHPLC 分析,产生的峰将相对较窄,需要更高的采集速率。
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就这么简单!

附加信息

此步骤可用 QuickStart 或 Pro 界面完成。

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