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基线噪音:手动计算 - Tip294

目的

从手动计算开始,测量基线噪音用于计算信噪比。

环境

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  • Empower 每周小贴士 #294

步骤

步骤 1
通常,噪音是在色谱图中基线相对平坦且没有伪色谱峰的区域进行测量的。测量噪音的这一代表性基线部分通常与色谱运行时间成正比(图 1)。
Figure_1.png

步骤 2
当测量噪音以计算信噪比时,所选的噪音区域通常与目标色谱峰的峰宽成正比(图 2)。
Figure_2.png

步骤 3
让我们利用显示的基线部分来探索一些导致基线噪音测量难以确定的变量。

  1. 对于将噪音计算作为检测限 (LOD) 或定量限 (LOQ) 等关键验证因素的基础的用户而言,在不同的色谱软件包中使用各种计算方法可能会令人沮丧。
  2. 如果实验室常规使用来自多个供应商的色谱软件,那么化学家们通常都需要通过手动计算色谱噪音来消除各种软件包之间的差异。
  3. 在使用单一供应商软件的环境中,化学家通常依靠软件计算噪音。然而,如果需要将方法转移到使用不同软件的实验室,或者如果实验室在某些时候决定切换到其他供应商的软件,仅凭软件计算就可能会出现问题。

手动计算具有主观性和耗时性,而自动计算取决于使用的供应商软件。那么,实验室应该怎样保证一致性呢?答案是要了解每个软件产品所使用的计算方法,包括您目前实验室中的软件,以及您将把自己开发和配置的方法转移过去的实验室中的软件(图 3)。
Figure_3.png

步骤 4
如果选择手动测量噪音,那么就需要大量化学家合作才能获得示例色谱图噪音下限的一致结果。然而,划定上限可能有着更大的争议性。我们应该在哪里测量噪音的大小?应该在色谱图的右侧还是在色谱图的左侧?为了消除这个问题,我们是否应该要求上限和下限彼此平行(图 4)?
Figure_4.png

步骤 5
平行线放在哪里?是否将 26.6 分钟处的尖峰作为异常值剔除?如果未剔除,是否会高估此色谱图中的噪音测量值?或许您应该选择没有这些异常值的其他区域来测量噪音(图 5)。
Figure_5.png

步骤 6
这一部分怎么样?我们实际上并不建议在此处测量噪音。这可能过于极端,不能反映您实验室中的化学家的实际操作,但它确实证明了在没有适当的分析员培训且没有特定变量(如要使用的时间区域和 y 轴缩放)的情况下使用手动计算的高度主观性(图 6)。
Figure_6.png

我们注意到,手动计算在很大程度上具有主观性,并且可能会在经过验证的实验室环境中导致临界结果出现问题。下周的贴文将对峰到峰噪音等的自动计算应用进行讨论。

附加信息

可以使用 Pro 或 QuickStart 界面完成以上步骤。