在 GlycoWorks RapiFluor-MS 方案的变性步骤中,什么原因可能会导致糖蛋白沉淀?- WKB238648
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环境
- 糖蛋白
- GlycoWorks RapiFluor-MS
- 变性
- 二硫键
- 三(2-羧乙基)膦盐酸盐 (TCEP HCL)
- 还原剂
答案
糖蛋白可能含有大量二硫键,这可以防止蛋白质仅在 RapiGest SF 存在的情况下变性。
附加信息
可能需要添加 TCEP(还原剂)以破坏某些蛋白质中的二硫键,从而使变性步骤可以在不发生蛋白质沉淀的情况下完成。稀释样品中 TCEP 的最终浓度(热变性前)应为 4 mM。
有关详细信息,请参阅以下文档中的糖基释放方法开发/故障排除部分:
GlycoWorks RapiFluor-MS N-Glycan Kit - 24 Samples Care and Use Manual(《GlycoWorks RapiFluor-MS N-糖分析试剂盒 24 样品维护和使用手册》,第 7 页)
GlycoWorks RapiFluor-MS N-Glycan Kit – 96 Sample - Care and Use Manual(《GlycoWorks RapiFluor-MS N-糖分析试剂盒 96 样品维护和使用手册》,第 7 页)
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