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在 ACQUITY Premier BEH C18 AX 游离糖分析专用柱上执行 RapiFluor-MS 标记的游离 N-糖分析时,为什么在第一天的色谱图上看到非常大的拖尾峰,而第三天没有?- WKB235313

环境

  • GlycoWorks
  • RapiFluor-MS
  • 游离 N-糖
  • 拖尾峰
  • ACQUITY Premier BEH C18 AX 游离糖分析专用柱
  • XBridge Premier BEH C18 AX 游离糖分析专用柱
  • 混合模式
  • 反相
  • 阴离子交换 (AX)
  • 亚乙基桥杂化颗粒 (BEH)

答案

制剂组分可能被转化为半稳定(亚稳定)的 RapiFluor-MS (RFMS) 标记中间物质。

之前已经在一些制剂中观察到这种情况。

通常,这些亚稳定物质会在自动进样器中温育(20 °C)的第三天时发生降解,此时色谱柱不会继续显示大拖尾峰。

在标记的第一天对样品进行脱盐处理,然后更换为硼酸盐缓冲液,这样应该会获得更干净的色谱图(很少有或没有意外的大拖尾峰)。

附加信息

对标记的糖进行 SPE 纯化后,立即在 ACQUITY Premier BEH C18 AX 游离糖分析专用柱上分析 RFMS 标记的促红细胞生成素 (EPO) 游离 N-糖:

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在自动进样器中 20 °C 下温育三天后,在 ACQUITY Premier BEH C18 AX 游离糖分析专用柱上分析 RFMS 标记的促红细胞生成素 (EPO) 游离 N-糖示例:

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信息图表:

MaxPeak Premier | 非特异性吸附 - 信息图表

ACQUITY Premier C18 AX Charge-Based Glycan Solution - Infographic(《ACQUITY Premier C18 AX 基于电荷的游离糖解决方案信息图表》)

维护和使用手册:

ACQUITY Premier Glycan BEH C18 AX Columns and IonHance Glycan C18 AX Ammonium Formate Concentrate Care & Use Manual(《ACQUITY Premier BEH C18 AX 游离糖分析专用柱和 IonHance Glycan C18 AX 甲酸铵浓缩液维护和使用手册》,文献编号 720007065EN)

应用纪要:

MaxPeak 高性能表面技术改善游离 N-糖的 HILIC 分析(文献编号 720007263)

使用 ACQUITY Premier BEH C18 AX 游离糖分析专用柱和装配 ACQUITY Premier 产品的 BioAccord 系统对促红细胞生成素进行游离寡糖分析 (720007356)

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