使用 ACQUITY Premier BEH C18 AX 游离寡糖分析专用柱时，如何减少 RapiFluor-MS 空白中的干扰峰？- WKB231393

环境

• 混合模式色谱
• 亚乙基桥杂化颗粒 (BEH)
• 阴离子交换 (AX)
• GlycoWorks
• RapiFluor-MS
• ACQUITY Premier BEH C18 AX 游离寡糖分析专用柱

答案

请参阅：使用 MS 增强衍生化和混合模式色谱法进行高灵敏度酸性 N-糖分析

附加信息

上方链接的文章摘录：

“鉴于混合模式色谱的选择性，它被认为比 HILIC 更易受到样品制备的干扰。来自 RFMS 的几个荧光活性试剂峰衍生化在游离寡糖洗脱窗口内进行鉴别。我们发现这些峰中的大多数峰是由游离寡糖衍生化反应的副产物和 SPE 净化步骤中掺入的一些杂质引起的。通过调整原始 RFMS 样品制备方案，可以显著减少每种干扰 [18]。通过重复 SPE 净化步骤成功去除了 m/z 值 450.2 Da 的 RFMS 副产物峰（补充图 S5），以及在酶解糖基释放之前，通过样品脱盐去除了另一个由磷酸盐离子引起的干扰宽峰（补充图 S6）。这些干扰不会影响 MS 检测，因为可以在 700 到 2000 m/z 的采集窗口范围内对 RFMS 标记的游离寡糖进行选择性检测。值得一提的是，额外的 SPE 净化步骤导致的样品损失微不足道。对于本研究中的样品，我们发现与进行 1 次 SPE 相比，进行 2 次 SPE 获得的游离寡糖的回收率超过 90%。有关 SPE 步骤优化的详细信息，请参阅补充材料。”

另请参阅：

将 RapiFluor-MS 空白样进样到 ACQUITY Premier BEH C18 AX 游离寡糖分析专用柱时，通常会看到哪些峰？

MaxPeak Premier | 非特异性吸附 - 信息图表

ACQUITY Premier C18 AX Charge-Based Glycan Solution Infographic（《ACQUITY Premier C18 AX 基于电荷的游离寡糖解决方案信息图表》）

ACQUITY Premier Glycan BEH C18 AX Columns and IonHance Glycan C18 AX Ammonium Formate Concentrate Care & Use Manual（《ACQUITY Premier BEH C18 AX 游离寡糖分析专用柱和 IonHance Glycan C18 AX 甲酸铵浓缩液维护和使用手册》）