Sirocco 蛋白沉淀板（186002448 或 186003873）的标准操作程序是什么？- WKB119433

环境

• Sirocco

答案

Sirocco 蛋白沉淀板的标准操作程序如下：

步骤 1 - 准备

将 Sirocco 板放在收集板上。这样可以在处理过程中保护阀的尖端。

步骤 2 - 添加有机溶剂以进行沉淀（乙腈）

向所有孔中添加沉淀溶剂。与样品的溶剂比例至少为 3:1。推荐的沉淀溶剂为乙腈。Sirocco 板经专门设计，可防止此步骤中溶剂从板中渗漏出来。

步骤 3 - 上样

快速向孔中添加 20-200 µL 样品（例如血浆、尿液）。将样品快速添加到有机溶剂中进行沉淀，然后混合以开始沉淀过程。

步骤 4 - 密封

使用盖辊置放排气盖垫，以进行可靠且均匀的密封。这样可以防止混合过程中出现液滴和串扰。

步骤 5 - 混合

使用中等设置（例如，1-10 的范围，可设置为 5），使用涡旋混合器（例如 VWR 的 Multi-Tube Vortexer）摇动（混合）已上样的 Sirocco 板/收集板组件 0.5-1.0 分钟。

注意：在过滤之前，不必从 Sirocco 板上拆下排气盖垫或阀尖。这样可消除孔之间串扰的风险。阀和排气盖垫设计为在真空下打开，可帮助用户在过滤过程中控制流量。注意：以较高的设置（例如，1-10 的范围，可设置为 8）过度混合会导致串扰。在混合过程中（例如，1-10 的范围，设置为 2），可能会发生滤液堵塞和混浊。

步骤 6 - 过滤器

混合后，将 Sirocco 板放置在真空萃取装置（例如，Waters 真空萃取装置 186001831）上，并施加 8-5 in. Hg (271-508 mbar) 的真空，最多 3 分钟。如果在 10 in. Hg 下没有流量，则可以设置更高的真空度。注意：Sirocco 独特的阀尖设计可使液体在施加至少 5 in. Hg (169 mbar) 的真空之后才会通过设备。注意：可以使用离心机（@ 2,000×g，1 分钟）代替真空系统过滤 Scirocco 板。

步骤 7 - 分析

取出 Sirocco 板，从真空系统中取出包含透明滤液的收集板，密封并转移到 LC/MS 自动进样器中，或保存以备后用。注意：无需从 Sirocco 板上拆下盖垫或阀尖。过滤后请将 Sirocco 板丢弃。

附加信息

Sirocco 蛋白沉淀板 720003377EN 维护和使用
https://www.waters.com/waters/suppor...1442&type=USRM