在运行相同的等度方法时，为什么新的 C18 色谱柱分析强酸化合物 (pH 3.7) 时展示的保留时间比相同部件号的旧色谱柱长，而分析中性化合物时未展示保留时间差异？- WKB94543

环境

• 反相色谱保留
• C18 色谱柱
• 选择性漂移
• 保留时间漂移

答案

与旧（用过）的 C18 色谱柱相比，新的 C18 色谱柱往往含有更多的 C18 配体和封端基团，可影响保留性和选择性。

附加信息

旧的 C18 色谱柱往往会在水解过程中丢失封端基团和 C18 配体。

水解过程中，越来越多的封端基团和 C18 配体会从颗粒表面脱落。

每次封端基团或配体从颗粒表面脱落时，都会暴露硅醇基 (Si-OH)。

在 pH 值为 3.7 的情况下，强酸带负电。此外，暴露的硅醇基带大部分负电。

如果旧色谱柱暴露的硅醇基较多，相比部件号相同的新色谱柱而言，其填料表面会出现更多的负电荷。

随着暴露的硅醇基数量增加，这些带负电荷的（质子化）硅醇基将更快地排斥带负电的酸。

而对于部件号相同的新色谱柱，暴露的硅醇基较少，因此，强酸不会遭到表面负电荷的排斥，所以在新色谱柱上的保留时间更长。

在这种情况下，由于中性化合物在旧色谱柱和新色谱柱上的保留时间没有差异，因此两种色谱柱上的 C18 配体含量应仍然相似。

另请参阅：为什么新的 C18 色谱柱在运行等度方法时展示的保留时间比相同部件号的旧色谱柱长？

另请参阅：是否应该在已使用的或旧的色谱柱上开发新的 LC 方法？