如何使用反相色谱更好地分离化合物?- WKB70232
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环境
色谱柱
答案
以下是一些有助于改善分离度的通用提示:
1. 温度可以帮助分离化合物。例如,ACQUITY BEH C18 颗粒非常耐用,在低 pH 条件下可耐受最高 80 ℃ 的温度,在高 pH 条件下可耐受 60 ℃ 的温度。尝试以 5 度为增量调整温度。有时,降低温度可以实现更好的分离效果。
2. 尝试在目标峰出现处运行较缓的聚焦梯度。
3. 更换有机改性剂有时可能会改变分离度。
4. pH 可能会影响分离效果。例如,ACQUITY BEH C18 的 pH 容差范围为 1-12。
5. 使用更长的色谱柱或更小粒径的色谱柱,提高色谱柱分离能力。分离度系数越大(长度/颗粒直径 - L/dP),色谱柱分离化合物的能力就越高。
6. 优化流速有助于分离化合物。