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如何清洗 Delta Pak 300A C18 色谱柱?- WKB54535

目的

清洗 Delta Pak 色谱柱,去除其中的污染物和/或蛋白质样品沉积。

环境

  • 色谱柱清洗
  • Delta Pak

步骤

  1. 如果使用等度流动相清洗方案,则每种溶剂都应冲洗 20 倍柱体积 (CV)。
  2. 将柱温提高到 35 °C 将有助于清洗。
  3. 对于极性样品,使用等度流动相:先使用 20 CV 的水开始清洗,然后用 20 CV 的甲醇,然后是 20 CV 的异丙醇,最后再用 20 CV 的 100% 水冲洗完成。
  4. 对于蛋白质样品:
  • 选项 1:低流速重复进样 100 µL DMSO,输送 50% 的洗脱液 A 和 50% 的洗脱液 B
  • 选项 2:梯度为 10%-90% B,其中 A = 0.1% TFA 水溶液,B = 0.1% TFA 乙腈溶液
  • 选项 3:使用 7M 盐酸胍或 7M 尿素冲洗色谱柱

附加信息

有关详细信息,请参阅:如何计算色谱柱的空色谱柱体积?