为什么我的 4.6 mm 内径 SEC 和 GPC 色谱柱在 HPLC 系统中峰形不佳并且出现宽峰，而使用 7.8 mm 内径 SEC 和 GPC 色谱柱通常能成功？- WKB48380

环境

• SEC 和 GPC 色谱柱

答案

系统扩散或谱带展宽会影响峰形，且对于色谱柱尺寸而言过大。

附加信息

SEC 和 GPC 分离原理为慢流技术，其中谱带展宽对峰形和分离度有很大影响。分离发生在色谱柱的间隙中。当系统谱带展宽对于色谱柱尺寸而言过高时，会在经过仪器进入色谱柱时影响峰宽。

系统必须经过优化，减少系统扩散或谱带展宽，以便运行 4.6 mm 内径色谱柱。

有关详细信息，请参阅 ACQUITY UPLC Protein BEH SEC Columns and Standards Care and Use Manual（《ACQUITY UPLC BEH SEC 蛋白分析专用柱和标准品维护和使用手册》）第 II 节“配置 ACQUITY UPLC 以便用于蛋白质 SEC 分离并实现最佳分离性能”。

另请参阅 SEC 分离发生拖尾和/或分离度降低时的注意事项