如何为我的反相应用选择最佳的色谱柱内径 (ID)？- WKB259344

环境

• 色谱柱特性

答案

根据测得的系统扩散体积匹配色谱柱 ID。

（请参阅“附加信息”）

 

附加信息

所有 LC 系统固有的谱带展宽（扩散）与进样器和检测器之间的系统流路体积直接相关（未安装色谱柱），该体积会导致柱效或色谱性能/分离度下降。

 

为了获得最大柱效，应根据仪器的特定谱带展宽值（系统扩散）选择色谱柱内径，因为体积较大（较大的色谱柱内径）的色谱柱不易受到系统体积（扩散）的负面影响。

 

以下是一些有关如何根据系统谱带展宽（扩散）测量值确定最适合的色谱柱内径的通用指导原则：

 

如果您的系统谱带展宽（扩散）值大于 120 μL：

• 为了成功运行 4.6 mm 内径的色谱柱，可能需要使用内径较小的管路（例如 0.010" 或 0.009"）以减少系统谱带展宽（扩散）。
• 也可以尝试增加目标分析物的保留时间 (tR)。
• 保留时间更长的峰的洗脱体积更大，并且不易受到系统谱带展宽（扩散）效应的影响。
• 容量因子 > 2.0 为首选。
• 请参阅色谱分析中确定峰容量因子的作用和重要性是什么？

如果系统谱带展宽值为 80 μL-120 μL，则您应该能够运行 4.6 mm 内径的色谱柱，而不必担心系统谱带展宽（扩散）效应。

• 也可以尝试增加目标分析物的保留时间 (tR)。
• 容量因子 > 2.0 为首选。
• 保留时间更长的峰的洗脱体积更大，并且不易受到系统谱带展宽（扩散）效应的影响。
• 请参阅色谱分析中确定峰容量因子的作用和重要性是什么？

如果系统谱带展宽值为 26 μL-80 μL，则应该能够运行 3.0 mm 内径（或 4.6 mm 内径）色谱柱，而不必担心由于系统体积而导致的峰展宽。

• 较小的 3.0 mm 内径有助于节省溶剂。
• 4.6 mm 内径的色谱柱仍然是一个不错的选择，因为较宽的内径不易受系统谱带展宽（扩散）效应的影响。

如果系统谱带展宽值在 25 μL 或以下，则您应该能够运行 2.1 mm 内径（或 3.0 mm、4.6 mm 内径）的色谱柱，而不必担心由于系统谱带展宽（扩散）体积而导致的峰展宽。

• 通常使用 0.005" 内径的管路可获得小于 25 µL 的系统谱带展宽（扩散）体积。
• 2.1 mm 内径的色谱柱适用于质谱，因为 MS 方法使用的流速较低。
• 就谱带展宽对峰宽产生的不利影响而言，25 µL 是使用 2.1 mm 内径色谱柱的谱带展宽值上限。
• 也可以尝试增加目标分析物的保留时间 (tR)。
• 容量因子 > 2.0 为首选。
• 保留时间更长的峰的洗脱体积更大，并且不易受到系统谱带展宽（扩散）效应的影响。
• 如果使用光学检测，且填料的粒径小于 2.0 μm，则建议使用 3.0 mm 内径的色谱柱。
• 较大的色谱柱内径不易受到系统谱带展宽的影响。
• 请参阅色谱分析中确定峰容量因子的作用和重要性是什么？