如何防止分析物非特异性吸附至反相色谱柱？ - WKB242579

环境

• 非特异性吸附
• 饱和度
• 不锈钢
• 灵敏度低

答案

重复进样更高浓度的目标分析物。

附加信息

分析物的非特异性吸附以两种方式发生：

• 通过阴离子交换吸附到不锈钢表面（钢上带正电荷）。
• 吸附到颗粒表面活性位点（例如，硅醇基、通道金属（如果存在）等）

如果对正在吸附的目标分析物进行高浓度（例如，小分子浓度为 1 mg/mL，或生物分子浓度为 4 mg/mL）进样，则会饱和样品室不锈钢表面的“活性位点”损坏色谱柱和/或颗粒。当这些活性位点完全饱和时，可以增加分析物回收率，减少拖尾。当活性位点适当饱和时，保留时间也可能减少。

为了针对色谱柱生物分子，甲状腺球蛋白进样发现非常有效。

对于胰岛素测试，进样蛋白沉淀的啮齿动物血浆可以有效。

注：Waters 已推出的 MaxPeak Premier LC系统（ACQUITY Premier、Arc Premier）和色谱柱（ACQUITY Premier BEH等），这些系统具有 MaxPeak 高性能表面，可降低金属表面的分析物吸附。