运行反相 LC 色谱柱时出现峰拖尾的常见原因是什么？- WKB237593

环境

• 超高效液相色谱 (UPLC)
• 超高效液相色谱 (UHPLC)
• 高效液相色谱 (HPLC)
• 峰拖尾
• 故障诊断排除

答案

如果所有峰都拖尾，可能的原因包括：

1. 如果所有分析物均为碱性，则所有峰都可能出现“碱性拖尾”：

• 如果出现以下情况，在反相色谱柱上，碱性分析物将通过弱阳离子交换出现拖尾：
  1. 流动相的 pH 允许碱性分析物带阳性电荷
  2. 流动相的 pH 会使颗粒表面的残留硅醇基带负电（通常 pH 约为 2.5 或更高）
  3. 如果符合上述标准，且未使用离子对试剂

2. 进样器和检测器之间流路的某处连接不正确；例如：

• 使用 PEEK 手紧接头时管路滑动
• 不锈钢接头或其他接头上的锥箍深度不合适
• 连接内部有小空隙

3. 强样品溶剂效应（有时可能会影响所有峰，并可能显示拖尾，尽管通常被视为峰形不对称或分裂）；例如：

• 当样品稀释液中非极性溶剂（反相）的百分比比起始流动相高时
• 当样品稀释液中的极性溶剂（正相；HILIC）比起始流动相高时

4. 如果运行质谱仪，发射器可能脏污，导致出现峰形问题。喷头中也可能有死体积（免工具版本除外）。

 

如果只有一些峰在其他几个峰的混合中拖尾，可能有以下原因：

1. 如果特定分析物为碱性而其他分析物不是，则仅在某些峰上会出现“碱性拖尾”。

• 如果出现以下情况，在反相色谱柱上，碱性分析物将通过弱阳离子交换出现拖尾：
  1. 流动相的 pH 允许碱性分析物带阳性电荷
  2. 流动相的 pH 会使颗粒表面的残留硅醇基带负电（通常 pH 约为 2.5 或更高）
  3. 如果符合上述标准，且未使用离子对试剂

2. 强样品溶剂效应（有时可能只影响较早洗脱的峰，并可能显示拖尾，尽管通常被视为峰形不对称或分裂）；例如：

• 当样品稀释液中非极性溶剂（反相）的百分比比起始流动相高时
• 当样品稀释液中的极性溶剂（正相；HILIC）比起始流动相高时

 

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