为什么在流动相中使用甲酸时，碱性分析物在反相色谱柱上出现峰拖尾，而使用三氟乙酸时则不会？- WKB236325

环境

• 液相色谱
• 峰拖尾
• 三氟乙酸 (TFA)
• 甲酸 (FA)

答案

碱性物拖尾：
颗粒表面带正电荷的碱与表面带负电荷的硅醇进行离子交换时，可能会产生拖尾。

如果使用 0.1% 甲酸 (FA)：

• 颗粒表面的硅醇在 0.1％ 甲酸中仍将带有一些负电荷，因为 pH 值不够低，不足以将它们全部质子化。
• 如果碱的 pKa 大于 5.0，则碱性分析物在 0.1％ 甲酸中将带正电荷。如果 pKa 小于 5.0，碱性分析物上的一些胺仍将带正电荷。
• 当带正电荷的碱性分析物与带负电荷的硅醇形成离子对时，会导致阳离子交换而产生拖尾。

如果使用 0.1% 三氟乙酸 (TFA)：

• 0.1% TFA 可使水溶液的 pH 降至约 2.0：
  • 在此 pH 条件下，颗粒表面的大部分硅醇基团被中和（但不是全部）。
• TFA 将与进样样品中带正电荷的胺形成离子对：
  • 这实际上将中和胺上的正电荷。
    • 产生疏水性更强的分析物
• 大部分表面硅醇基的中和以及与带正电荷的胺形成离子对，可有效地防止阳离子交换机制（像仅在甲酸中一样）的发生。
  • 使用 TFA 可大幅减少流动相中拖尾。

附加信息

在质谱中，TFA 会导致离子抑制。

Waters 现在提供 IonHance LCMS 级二氟乙酸。与甲酸相比，DFA 也会导致离子抑制，但不如 TFA 抑制得多。

请参阅：

IonHance MS 级流动相添加剂网站

IonHance 二氟乙酸信息图表

IonHance Difluoroacetic Acid Care and Use Manual（《IonHance 二氟乙酸维护和使用手册》）

IonHance LCMS 级 DFA 相关应用纪要：

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