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如何将 ACQUITY UPLC 方法/色谱柱转移到 HPLC 方法/色谱柱?- WKB231157

目的

将使用 ACQUITY UPLC 色谱柱的 ACQUITY UPLC 方法转移到使用 HPLC 色谱柱的 HPLC 系统。

环境

  • 方法转移
  • UPLC 色谱柱
  • HPLC 色谱柱
  • ACQUITY

步骤

  1. 选择与 ACQUITY 色谱柱具有相同键合相的 HPLC 色谱柱,但粒径较大。
  2. 测定每个系统的系统驻留体积。
  3. 方法转换计算器 2.0 版左侧指定原始方法信息,包括系统驻留体积。
  4. 在计算器右侧指定 HPLC 色谱柱尺寸、粒径和 HPLC 系统驻留体积。
  5. 计算器将按比例计算 HPLC 色谱柱的进样体积、流速和梯度。

附加信息

保持原始色谱柱与新色谱柱相似的“L/Dp”值有助于在转移方法上保持相似的分离度。

如果将方法转移到 L/Dp 值低于原始色谱柱的色谱柱上,则转移方法的分离度会降低。

如果将方法转移到 L/Dp 值高于原始色谱柱的色谱柱上,则转移的方法的分离度将更高。

(L/Dp = 长度/颗粒直径)

请参阅:LC 色谱柱的 L/Dp 比较表

另请参阅:

Waters 方法转换计算器用户指南信息图

Dwell Volume and Extra-Column Volume: What Are They and How Do They Impact Method Transfer(《驻留体积和柱外体积分别是什么?它们如何影响方法转换?》)

Successful Transfer of Size-Exclusion Separations between HPLC and UPLC(《将体积排阻色谱分离方法从 HPLC 成功转换至 UPLC》)

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成功转换 LC 方法的基本原理 - 从 HPLC 到 UPLC

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