在我的反相 LC 方法中，为什么只有一两个峰的保留时间发生偏移，而同一方法中的其他峰没有偏移？- WKB229859

环境

• 反相 LC
• 故障诊断排除
• 峰偏移
• 保留时间

答案

潜在原因：

• 流动相的 pH 值漂移，这会改变可电离化合物的保留时间。
• 样品稀释剂中强有机溶剂的百分比过高，这会导致最早洗脱峰的变化。
• 特定方法条件下特定分析物的选择性差异（批次间）。

附加信息

如果流动相 pH 值高于或低于正在移动分析物的 pKa 小于 2 个 pH 单位，请尝试将 pH 值调整至高于或低于所有分析物的 pKa 至少 2 个 pH 单位，以获得更稳定的方法。

Waters 强烈建议在验证方法时分别从三个不同批次（凝胶批次）的色谱柱中筛选三个色谱柱。这是一个关键点。有时，尽管筛选了许多“批次”，但仅使用了一个批次的色谱柱。对于大多数 Waters 色谱柱而言，批号（或序列号）的前四位数字表示填充色谱柱的批次（凝胶批次）。Waters 的许多色谱柱均以方法认证套件 (MVK) 的形式出售，其中包括三根色谱柱，每根色谱柱填充来自不同批次的填料。用于认证的三个批次之间的任何差异都表明该方法不稳定，且该方法在使用周期内会受到批次变化的影响。

请参阅：

如何解释 Waters 色谱柱的 14 位序列号？

方法认证挂图