为什么在执行 SEC 方法时，在增加缓冲液摩尔浓度时，聚集体百分比会增加？- WKB229751

环境

• 体积排阻色谱 (SEC)
• 高分子量物质 (HMWS)
• 聚集体
• 二聚体
• 三聚体

答案

随着盐摩尔浓度的增加，疏水相互作用增加，导致蛋白质聚集速率加快。

附加信息

使用 Alliance 系统或具有此功能的其他 Waters LC 系统上的 Autoblend 功能来执行 pH 和摩尔浓度研究，以了解变化如何影响蛋白质行为。

使用 pH 6.0 的恒定 20 mM 磷酸盐缓冲液
在 pH 6.0 时：
运行 100 mM 氯化钠流动相 - 监测结果
运行 150 mM 氯化钠流动相 - 监测结果
运行 200 mM 氯化钠流动相 - 监测结果
运行 250 mM 氯化钠流动相 - 监测结果

使用 pH 6.5 的恒定 20 mM 磷酸盐缓冲液
在 pH 值 6.5 时：
运行 100 mM 氯化钠流动相 - 监测结果
运行 150 mM 氯化钠流动相 - 监测结果
运行 200 mM 氯化钠流动相 - 监测结果
运行 250 mM 氯化钠流动相 - 监测结果

使用 pH 7.0 的恒定 20 mM 磷酸盐缓冲液
在 pH 7.0 时：
运行 100 mM 氯化钠流动相 - 监测结果
运行 150 mM 氯化钠流动相 - 监测结果
运行 200 mM 氯化钠流动相 - 监测结果
运行 250mM 氯化钠流动相 - 监测结果

使用 pH 7.5 的恒定 20 mM 磷酸盐缓冲液
在 pH 7.5 时：
运行 100 mM 氯化钠流动相 - 监测结果
运行 150 mM 氯化钠流动相 - 监测结果
运行 200 mM 氯化钠流动相 - 监测结果
运行 250mM 氯化钠流动相 - 监测结果

这是可以真正确定哪种 pH 值和 NaCl 摩尔浓度可提供最佳结果的好方法。