可以使用 BEH125 SEC 蛋白质混标 (186006519) 通过 ACQUITY UPLC BEH SEC 蛋白分析专用柱 (125Å, 1.7 µm, 4.6 mm × 150 mm, 186006505) 创建校正曲线吗？- WKB228431

环境

• 超高效液相色谱 (UPLC)
• 亚乙基桥杂化颗粒 (BEH)
• 体积排阻色谱 (SEC)
• 蛋白质分离
• BEH125 蛋白质标准品
• ACQUITY UPLC BEH SEC 蛋白分析专用柱

答案

不能

附加信息

您无法根据任何类型的校正曲线确定未知蛋白质的分子量。
原因是两种蛋白质在溶液中可以具有相同的分子量，但大小不同（流体动力学半径）。
因此，您不能像聚合物那样对生物分子使用校正曲线。

Waters 发布的 SEC 色谱柱校正曲线与 GPC 色谱柱的校正曲线不同。
已发布的 SEC 校正曲线只是为了显示基于孔径的色谱上限和下限。
这种校正曲线不是真正基于分子量，而是基于蛋白质的流体动力学半径。因为我们知道所测试蛋白质的分子量，所以我们可以给出分子量范围。

ACQUITY UPLC BEH SEC Columns and Standards Care & Use Manual（《ACQUITY UPLC BEH SEC 色谱柱和标准品维护和使用手册》）

Guide to Size-Exclusion Chromatography (SEC) of mAb Aggregates, Monomers, and Fragments（《单克隆抗体聚集体、单体和碎片的体积排阻色谱法 (SEC) 指南》）