如何在 Waters Styragel 色谱柱上执行溶剂转换程序，将 THF 转换为 DMF - WKB197282

目的

将 Styragel 色谱柱中的四氢呋喃 (THF) 转换为二甲基甲酰胺 (DMF)。

环境

• 凝胶渗透色谱 (GPC)
• Styragel色谱柱
• 溶剂转换

步骤

1. 将柱温箱设置为 50 °C。在引入 DMF 溶剂之前，让色谱柱在缓慢的流速下升至 THF 中的温度。（两小时后，将柱温箱升至 55 ℃），然后开始将溶剂转换为 DMF。过 2 h 后，将柱温箱温度升至 60 °C（在 100% DMF 中之后的操作，请参阅步骤 4）。
2. 对于 7.8 × 300 mm 的色谱柱，将泵流速设置为 0.1 mL/min。对于 6.0 × 150 mm 的色谱柱，在整个过程中将流速设置为 0.06 mL/min。对于 4.6 × 300 mm 的色谱柱，在整个过程中将流速设置为 0.03 mL/min。
3. 如果运行梯度模式，请将程序设置为四小时内从 95:5 THF/DMF 转换至 100% DMF。
   • 如果运行等度模式，请制定单独的 THF:DMF 解决方案，以 5% 的步长从 95:5 THF:DMF 逐步转换至 100% DMF，在四小时内增加 DMF 的强度。
4. 每根色谱柱使用 100％ DMF 冲洗 6 小时。
   • 如果色谱柱组中有两根色谱柱，则需冲洗总共 12 小时。
   • 冲洗体积相当于每根色谱柱 10 倍。
5. 此溶剂切换操作在色谱柱使用寿命内只能执行一次。

附加信息

对于传统的 GPC 色谱柱，如果色谱柱老旧且之前已使用很长时间，和/或色谱柱已接触过多种溶剂，则色谱柱损坏的风险会增加。

GPC 色谱柱 - 未执行溶剂切换时的通用操作程序：

• 以 7.8 x 300 mm 色谱柱为例，务必在 5 min 内从 0.1 mL/min 升至约 1 mL/min。
• 缓慢降低流速时，请执行同样的操作。
• 在 Styragel 色谱柱上执行 GPC 分离时的典型操作流速：
  • 7.8 x 300 mm 色谱柱 - 1.0 mL/min
  • 6.0 x 150 mm 色谱柱 - 0.6 mL/min
  • 4.6 x 300 mm 色谱柱 - 0.3 mL/min
• 如果色谱柱置于系统中但未使用，应始终保持最低 0.1 mL/min 的流速。请勿关闭泵的电源。