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运行 LC 色谱柱时出现峰分裂的常见原因是什么?- WKB194672

环境

  • 超高效液相色谱 (UPLC)
  • 超高效液相色谱 (UHPLC)
  • 高效液相色谱 (HPLC)
  • 峰分裂
  • 故障诊断排除

答案

如果所有峰都分裂,可能的原因包括:

1. 进样器和检测器之间流路的某处连接不正确;例如:

  • 使用 PEEK 手紧接头时管路滑动
  • 不锈钢接头或其他接头上的锥箍深度不合适
  • 连接内部有小空隙

2. 残留在色谱柱入口的颗粒可能是来源于以下物质:

  • 样品中的颗粒
  • 流动相中的颗粒
  • 微生物污染物

3. 强样品溶剂作用(有时可能会影响所有峰);例如:

  • 当样品稀释液中非极性溶剂(反相)的百分比比起始流动相高时
  • 当样品稀释液中的极性溶剂(正相;HILIC)比起始流动相高时

4. 如果运行质谱仪,发射器可能脏污,导致出现峰形问题。

5. 如果使用 HILIC 色谱法分析糖,则糖会形成端基异构体(开链和闭链)。

6. 色谱柱可能脏污(样品基质积聚)。

 

如果只有一些峰在其他几个峰的混合峰中分裂:

1. 强样品溶剂作用(有时会影响早期洗脱峰);例如:

  • 当样品稀释液中非极性溶剂(反相)的百分比比起始流动相高时
  • 当样品稀释液中的极性溶剂(正相;HILIC)比起始流动相高时

2. 如果使用 HILIC 色谱法分析糖,则糖会形成端基异构体(开链和闭链;并非总是所有峰)。

附加信息

 

ALLCOLCLR, ALLCOLHTR, ALLCOLHTRB, UPBINARY, UPSMPMGR