运行 LC 色谱柱时出现峰分裂的常见原因是什么？- WKB194672

环境

• 超高效液相色谱 (UPLC)
• 超高效液相色谱 (UHPLC)
• 高效液相色谱 (HPLC)
• 峰分裂
• 故障诊断排除

答案

如果所有峰都分裂，可能的原因包括：

1. 进样器和检测器之间流路的某处连接不正确；例如：

• 使用 PEEK 手紧接头时管路滑动
• 不锈钢接头或其他接头上的锥箍深度不合适
• 连接内部有小空隙
• 如果所有峰都受到影响，则死体积通常在色谱柱之后

2. 残留在色谱柱入口的颗粒可能是来源于以下物质：

• 样品中的颗粒
• 流动相中的颗粒
• 微生物污染物

3. 强样品溶剂作用（有时可能会影响所有峰）；例如：

• 当样品稀释液中非极性溶剂（反相）的百分比比起始流动相高时
• 当样品稀释液中的极性溶剂（正相；HILIC）比起始流动相高时

4. 如果运行质谱仪，发射器可能脏污，导致出现峰形问题。喷头中也可能有死体积（非免工具版本）。

5. 如果使用 HILIC 色谱法分析糖，则糖会形成端基异构体（开链和闭链）。

6. 色谱柱可能脏污（样品基质积聚）。

 

如果只有一些峰在其他几个峰的混合峰中分裂：

1. 强样品溶剂作用（有时会影响早期洗脱峰）；例如：

• 当样品稀释液中非极性溶剂（反相）的百分比比起始流动相高时
• 当样品稀释液中的极性溶剂（正相；HILIC）比起始流动相高时

2. 如果使用 HILIC 色谱法分析糖，则糖会形成端基异构体（开链和闭链；并非总是所有峰）。

3. 进样器和色谱柱之间流路的某处连接不正确；例如：

• 使用 PEEK 手紧接头时管路滑动
• 不锈钢接头或其他接头上的锥箍深度不合适
• 连接内部有小空隙
• 如果峰形随着保留时间的变化而变得更好，则死体积通常在色谱柱之前，并且由于重新聚焦在色谱柱上，峰形会恢复

附加信息