延长 SEC 色谱柱使用寿命有什么技巧 - WKB121506
环境
- 色谱柱使用寿命
- BEH
- 体积排阻色谱 (SEC)
- XBridge
- ACQUITY
- BioResolve SEC mAb
- BioSuite SEC
- ACQUITY Premier SEC 蛋白分析专用柱
- 维护和使用
- 提示
答案
SEC 色谱柱的使用寿命受生物缓冲液 pH 导致的微生物生长和颗粒的影响。
附加信息
对于共享系统:
1) 不建议 SEC 流动相容器使用流动相过滤器,因为过滤器是 SEC 色谱柱微生物污染的主要来源。
2) 在连接 SEC 色谱柱之前,请执行以下步骤以准备管路(摘自优化指南的第 29 页,请点击以下链接):
3) 使用系统上的 SEC 色谱柱时,放置两周以上的洗针液和密封清洗液应重新制备。
对于流动相制备:
1) 在制备 SEC 流动相时,必须使用高纯度的水(18.2 MΩ)。如果使用瓶装水,则必须在使用当天打开。
2) 所有缓冲流动相均应使用无菌的 0.22 µm 过滤器进行过滤。避免使用烧制玻璃过滤器;它们会导致硅酸盐从流动相中析出,会进一步污染 SEC 柱床并降低色谱柱使用寿命。
3) 如果流动相中盐浓度小于 150 mM,则必须每三天更换一次新鲜缓冲液,放在干净容器中。
如果流动相放置更长的时间,且用新鲜的流动相装满瓶子,将促进微生物的生长。
4) 更换流动相时,请务必同时更换流动相瓶/容器。
5) 所有流动相容器均应每天目视检查,以查看容器内是否有微生物生长和/或微粒。微生物生长可能会在瓶子表面形成一层薄膜,可以通过旋转瓶子来观察。
另请参阅 Trust my Science(相信科学)八分钟视频,以获取有关流动相中微生物生长的更多提示。
https://www.youtube.com/watch?v=5b_WYgDVtOA
有关详细信息,请参阅 Guide to SEC of mAb's, aggregates, monomers and fragements(《关于 SEC 分析 mAb 聚集体、单体和碎片的指南》)[1]和如果怀疑色谱柱上有蛋白质沉淀,应如何清洁 ACQUITY BEH SEC 色谱柱或 XBridge BEH SEC 色谱柱?
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