如果化合物带有两个胺基团，AccQ•Tag 试剂会在两个位点发生反应吗？- WKB78677

环境

• 氨基酸分析 (AAA)
• 赖氨酸
• 衍生化

答案

理论上，同一分子上的第一和第二个胺基团都会生反应。
但在试剂操作中，为了让这种反应重复、可靠地发生，可能需要优化反应步骤。

（请参阅“附加信息”）

附加信息

Waters 标准品中的每种氨基酸都以不同的速率衍生化，具体取决于它们的化学性质。

赖氨酸有两个伯胺基团；如果衍生化顺利进行，可观察到一个双衍生化赖氨酸峰。这是最大的峰。在解决衍生化问题时，有时会观察到第二个赖氨酸峰。第二个赖氨酸峰是只有一个胺基团发生了衍生化的结果（这意味着衍生化过程进行得不顺利 - 样品过多、试剂降解、pH 过低、样品混合不充分……）。这会产生响应较低的单衍生化赖氨酸峰。

赖氨酸上的（第二个）仲胺基团是反应最慢的基团之一，不会快速衍生化，但试剂峰（与水分子上的 OH 基团反应，反应速率是第一和第二个胺基团反应速率的 1/1000）大小正常。

为了让第一和第二个胺基团全都衍生化，可能需要优化反应步骤。请改进或更正以下问题之一：样品过多、试剂降解、pH 过低、样品混合不充分。