是否可以使用 ProteinWorks Auto-eXpress Low 3 快速酶解试剂盒 (176004077) 的三步方案识别和定量蛋白质中含半胱氨酸残基的二硫键？

环境

• ProteinWorks Auto-eXpress Low 3 快速酶解试剂盒
• Xevo TQ-S

答案

此三步方案不会影响含半胱氨酸残基的二硫键。二硫键可以使用质谱法进行定量。

附加信息

如果不使用质谱法，很难定量样品中的二硫键。如果仅使用 UV，保留时间无疑会有所变化。此外，由于此分析主要是一种质谱分析应用，在 UV 应用中定量，可能需要大幅增加酶解缓冲液、胰蛋白酶溶液、酶解灭活剂和其它试剂的量。Waters 没有数据表明某些肽的二硫键在 UV 范围内具有良好的灵敏度。ProteinWorks Auto-eXpress Low 3 快速酶解试剂盒 (176004077) 是一款自动化试剂盒，可以优化 MS 应用中每种试剂/标准品的量。如果不使用质谱法进行定量分析，则必须优化试剂体积、培养时间和培养温度。