使用 RapiGest 时，最佳的酶解时间、浓度和温度值是多少？- WKB64974

环境

• RapiGest

答案

酶解时间约为 1 小时。如果是强疏水性蛋白质，可能更长。

最佳 RapiGest 浓度为 0.25% - 0.1%。

培养温度应为 37 °C，培养 10 分钟左右。再置于冰上放置 45 分钟，酶解完全完成。

附加信息

“维护和使用手册”中的详细步骤：

向 50 mM NH4HCO3 中加入 20 μL 的 0.1% RapiGest SF 溶液，在 37 °C 下培养 10 分钟。

去除多余溶液，用 Speed Vac 彻底干燥凝胶片。

逐渐（每次一滴）向凝胶片中加入胰蛋白酶（12.5 ng/μL，溶于 50 mM NH4HCO3 中）直至凝胶再次溶胀。继续在冰上培养 45 分钟。

去除多余的溶液，加入 20 μL 的 50 mM NH4HCO3，在 37 °C 下培养过夜。

RapiGest SF Surfactant Care and Use Manual（《RapiGest SF 表面活性剂维护和使用手册》）